細(xì)胞灌流培養(yǎng)與產(chǎn)物連續(xù)收獲

應(yīng)用場景：
在哺乳動物細(xì)胞（如CHO細(xì)胞）培養(yǎng)中，通過TFF實(shí)現(xiàn)細(xì)胞截留，延長培養(yǎng)周期并提高產(chǎn)物（如抗體、病毒載體）滴度。

操作流程：

• ?系統(tǒng)配置：使用中空纖維膜包（如Repligen XCell ATF系統(tǒng)），膜孔徑0.2 μm，截留細(xì)胞但允許代謝廢物和產(chǎn)物通過。
• ?灌流控制：蠕動泵以低流速（如10 mL/min）循環(huán)培養(yǎng)液，維持細(xì)胞密度至1×10^7 cells/mL。
• ?產(chǎn)物收集：濾液中含有目標(biāo)產(chǎn)物（如抗體），每日取樣監(jiān)測濃度并定期收集。
• ?營養(yǎng)補(bǔ)充：根據(jù)消耗速率持續(xù)補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基，維持細(xì)胞活力。

優(yōu)勢：

• 培養(yǎng)周期可延長至30天以上，抗體產(chǎn)量提高3~5倍。
• 避免傳統(tǒng)批次培養(yǎng)的頻繁換液操作，降低污染風(fēng)險(xiǎn)。

注意事項(xiàng)：

• 需優(yōu)化剪切力（泵速）以防止細(xì)胞損傷（CHO細(xì)胞通常耐受剪切力<50 dyn/cm²）。
• 定期監(jiān)測膜堵塞情況（通過TMP升高判斷），必要時進(jìn)行反向沖洗（Backflush）。